公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
商品属性:
产品名称
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规格
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货号
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30min植物基因组DNA提取试剂盒
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50 次
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A-PJ1169
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描述:
该试剂盒采用独特的裂解液,可快速可靠的从多糖、多酚含量较高的植物组织样品中纯化出高纯度的 DNA。应用本试剂盒提取的 DNA 可直接用于限制性酶切反应、PCR、文库构建、Southern 杂交等多种分子生物学实验。
![](/usr/uploads/3/202309/30min植物基因组DNA提取试剂盒.png)
注意事项:
(1) 本试剂盒中的 Washing Buffer 中已经加乙醇,无需单独添加。
(2)蛋白酶 K 和 Rnase A 长期保存请储存于-20℃,短期室温保存(6 个月),其它组分储存于室温。
(3)Plant AP2 含有 CTAB,室温储存会出现白色沉淀,使用前放置于 56℃水浴锅中溶解后使用。
(4)自备试剂:氯仿。
操作方法
(1)样本组织悬液制备研钵研磨法:在 1.5 ml EP 管中加入 600 μl 的 Plant AP1 裂解液,并在管盖上加入 5 μl 的 Rnase A。将研磨后的植物组织(干重 40~60 mg,湿重 150 mg)加入到 Plant AP1 裂解液中,漩涡震荡混合 15s。钢珠研磨法:在研磨 EP 管中加入 700 μl 的 Plant AP1 裂解液,加入植物组织(干重 50~80 mg,湿重 200 mg),并加入钢珠进行研磨,研磨完毕后,取 600 μl 的组织悬液到新的
1.5 ml EP 管中,并在管盖上加入 5 μl 的 Rnase A。
(2)向上述组织悬液中加入 250 μl Plant AP2 裂解液,漩涡混合 15s,56℃水浴锅(或室温)静置 5min,以消化 RNA。
(3)向上述溶液中加入 20 μl 蛋白酶 K,漩涡混合 10s,于56℃水浴锅(或室温)中消化 5~15min。
(4)13,000rpm 离心 5min,吸取 600 μl 上清到新的 1.5mlEP 管中,并加入 500μl 的氯仿,漩涡混合 15s。
(5)13,000rpm 离心 2min,溶液将分为无色上层水相DNA)、中间层(蛋白)和绿色下层油相(酚类)。
(6)吸取 400 μl 上层无色上清液到新的 1.5 ml EP 管中,并加入 450 μl 的 Plant LB3 溶液,漩涡 10s 后,倒入到吸附柱中,13,000rpm 离心 1min。
(7)倒掉废液。向吸附柱中加入 500 μl Washing Buffer,13,000rpm 离心 15s。重复此步骤一次。
(8)将吸附柱重新放回离心机,13000rpm 空离心 2min,将残留的乙醇彻底甩干。
(9)将吸附柱芯放入到 1.5 ml 收集管中,向吸附柱芯中加入 60~150 μl DNA Elution Buffer,室温放置 1min,13,000rpm 离心 1min,洗脱液即为基因组 DNA,冷冻保存。