公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
商品属性:
产品名称
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规格
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货号
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RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul), 无甘油
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40KU
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A-PJ1050
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描 述 :
本酶为采用电子重构架技术重组表达的 RNase Inhibitor, 可高效的与 RNase A/B/C 形成 1:1 的复合物,从 而保护 RNA 免受降解。与野生型人源(human)、鼠源 (murine)、猪源(porcine) Inhibitor 比较来看,其在如下几方 面得到明显提升:(1)抗氧化/抗巯基类性能的提升,在 0-10mM DTT 浓度下,活性无明显差异,因此不仅适用于 PCR,也可适用于转录等高浓度 DTT 体系。(2)亲和力得 到明显提升,在特定条件下可以完全抑制 RNase,从而长效 保护体系中的 RNA 分子。(3)耐热性显著提高,在 55°C 条件下加热 10min 后,仍然保留 90%以上活性。
单位定义:抑制 5 ng RNase A 的 50%活性所需的 RNaseInhibitor 量定义为一个活性单位。
热失活:65°C, 10min
应用:
cDNA 合成反应体外无细胞系统转录或翻译提高多聚核糖体的产量和活性
储存:-80°C 可保存 3 年,-20°C 可保存 2 年。
由于该制品不含甘油成分,反复冻融 10 次的情况下,活性损失<5%。如制品经常使用,融化后建议储存于 2-8°C(2个月),或分装后冻存。
使用方法
1. 按以下组分配制反应体系
Golden MLV Reverse Transcriptase 0.5-1 μl
10×RT Buffer 2 μl
dNTP Mixture (10 mM each) 1 μl
Total RNA or Poly(A) RNA 0.1-2 μg
20×Oligo dT(25)&Random Primer * 1 μl
RNase Inhibitor (80 U/μl) 0.25 μl
RNase Free H2O Up to 20 μl
*注:Oligo dT(15)使用浓度为 20~50μM, 如使用 Random9随机引物可使用 125μM,基因特异性引物可使用 5μM。
2.在 PCR 仪上按下列条件进行反转录反应
30°C 15 min
55°C 30~60 min
85°C 10 min
4°C
3. 反转录所得的 cDNA 可直接用于 PCR 反应或储存于-20°C。