公司产品仅供科研研究使用、不得用于临床诊断!
商品属性:
产品名称
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规格
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货号
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pET-32a(+) Seamless Cloning Kit(线性化质粒
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20次
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A-Hc2228
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产品介绍:
pET-32a(+)载体为高水平的原核表达载体,在N端含有TrxA(Trx-tag,硫氧还蛋白标签)有利于蛋白的可溶性表达。pET-32a(+)在N端还含有His-Tag, Thrombin(凝血酶)酶切位点,S-Tag,Enterokinase(肠激酶)酶切位点,在C端具有His-Tag。本产品提供pET-32a(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,可用无缝克隆技术将单个或多个DNA片段组装到载体上。
无缝克隆技术可在重组酶的作用下,只需一步反应,便可将片段克隆到任何载体中的任意位置,得到重组质粒。无缝克隆技术作为一种非常强大的克隆技术,具有快速、简便、高效、多片段组装和定向克隆等特点,用于单个DNA片段的克隆,多个DNA片段组装克隆以及多位点突变构建等实验目的。
产品特点:
1. pET-32a(+)载体为原核表达载体,具有N-TrxA, N-His,N-Thrombin, N-S,N-Enterokinase和C-His。
2. pET-32a(+)经EcoRⅠ酶切后的线性化载体,省时省力。
3. 无缝克隆技术只需要简单的 PCR 扩增就可以制备片段DNA。
4. 可以克隆长片段和多片段DNA。
5. 简单、快速、精确、定向克隆。
操作步骤:
1. pET-32a(+)线性化载体使用方法:
(1) pET-32a(+)线性化载体当做克隆载体使用,可以在扩增PCR产物的
上游引物 5’端添加序列:GTACCGACGACGACGACAAGGCCATG
下游引物 5’端添加序列:CTCAGTGGTGGTGGTGGTGGTGCTCGAG
通过无缝克隆连接到pET-32a(+)中。
(2) 测序引物
PET-32A-SEQR: 5'-CTGGTTCTGGCCATATGCAC-3'
T7t: 5'-GCTAGTTATTGCTCAGCGG-3'
(3) pET-32a(+)线性化载体为 EcoRⅠ酶切后的线性化载体