土壤全钛试剂盒说明书
微量法100T/96S
注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义
钛是自然界广泛存在的过渡金属元素,与铁元素紧密共生,二者存在一定的相关性,土壤中钛对植物有及其重要的生理作用,充足的钛可保证植物结实率提高,空瘪率减少,并增强植物的抗害效果。
测定原理
在酸性条件下,二安替比林甲烷与钛离子生成黄色络合物,在390nm处有特征吸收峰,颜色深浅在一定范围内与钛离子浓度成正比。
自备实验用品及仪器
天平、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板,HCl。
试剂组成和配制
提取液:自备。HCl:H2O =1:1。
试剂一:粉剂×1瓶,4℃保存。
试剂二:粉剂×1瓶,4℃避光保存。临用前加4mL水充分溶解。
试剂三:液体8mL×1瓶,4℃保存。
样本处理
按照土壤质量(g):试剂一质量(g)为1:5的比例(建议称取约0.1g土样,加入0.5g试剂一)称取土样于坩埚中,在900℃熔融20min,趁热加10mL提取液溶解熔块,待完全溶解后于10000g ,25℃离心10min,取上清液待测。
测定操作表
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空白管
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测定管
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样本(μL)
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40
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试剂二(μL)
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40
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40
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提取液(μL)
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80
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40
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试剂三(μL)
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80
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80
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充分混匀,25℃静置30min,于微量石英比色皿/96孔板,测定390nm处吸光值A,分别记为A空白管和A测定管,△A=A测定管-A空白管
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计算公式
- 用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.1064x +0.0078,R2 = 0.9971
全钛含量(mg/kg)=(△A-0.0078)÷ 0.1064×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 469.92×(△A-0.0078)÷W
V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V样总:加入提取液体积,10mL,W:样本质量,g
- 用96孔板测定的计算公式如下
标准曲线:y = 0.0532x +0.0078,R2 = 0.9971
全钛含量(mg/kg)=(△A-0.0078)÷ 0.0532×V反总÷(W×V样÷V样总)
= 939.84×(△A-0.0078)÷W
V反总:反应总体积,0.2mL;V样:反应体系中加入样本体积,0.04mL;V样总:加入提取液体积,10mL,W:样本质量,g