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血清低密度脂蛋白(LDLC)测试盒(比色法)
AS6321200
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血清低密度脂蛋白(Low density lipoprotein cholesterol , LDL-C)试剂盒说明书

微量法  100/96样

注意:正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义

低密度脂蛋白血清蛋白之一,主要由肝脏合成,与冠心病的发生和动脉粥样硬化损伤呈正相关,是脂类疾病分类和风险预测的一个重要指标。

测定原理

用沉淀剂分离血清中的低密度脂蛋白胆固醇,利用酯酶催化胆固醇酯水解生成游离胆固醇和游离脂肪酸从而把胆固醇酯转化为FC;进一步利用胆固醇氧化酶催化FC氧化,生成△4-胆甾烯酮和H2O2利用过氧化物酶催化H2O2氧化4-氨基安替比林和酚,生成红色醌类化合物;在500nm有特征吸收峰。

需自备的仪器和用品

离心机,恒温水浴锅、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、蒸馏水。

试剂组成和配制

试剂一:液体20mL×1瓶,4℃保存。

试剂二:液体15mL×1瓶,4℃保存。

试剂三:粉剂×1瓶,-20℃保存。临用前加5mL试剂四充分溶解。

试剂四:液体10mL×1瓶,4℃保存。

标准品:液体1mL×1支,4℃保存。

样品处理

取血后3小时内分离血清,将血清样品与试剂一按照2:1的比例充分混匀,25℃静置15min,2000g离心15min,上清置于冰上待测。

测定操作表

 

空白管

标准管

测定管

蒸馏水(μL)

4

 

 

标准品(μL)

 

4

 

样本(μL)

 

 

4

试剂二(μL)

150

150

150

试剂三(μL)

50

50

50

混匀,37℃静置30min,于1mL玻璃比色皿,空白管调零,测定500nm处吸光值A。分别记为A标准管和A测定管

计算公式

  1. 用微量石英比色皿测定的计算公式如下

LDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管

                     =5×A测定管÷A标准管

C标准管:5mmol/L

b.用96孔板测定的计算公式如下

LDL-C含量(mmol/L)= A测定管÷A标准管×C标准管

                     =5×A测定管÷A标准管

C标准管:5mmol/L

注意事项

  1. 样本切勿反复冻融,最好在取血后12小时内完成测定。
  2. 配置好的试剂三4℃保存可半个月。
  3. 线性范围为0.17mmol/L- 4.2mmol/L。
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