通常生化试剂盒可分为液体单试剂和液体双试剂,前者特别适用于半自动生化分析仪和小型自动生化分析仪,使用方便,缺点是稳定性较差。与单试剂相比,双试剂提高了抗干扰能力,具有稳定性能较好,可消除样品自身空白等特点。此外还有多项同测组合试剂、浓缩试剂等。
生化试剂盒选购和使用注意事项:
1、选购试剂盒前请弄清以下问题:
① 根据取样记录,确认样品情况。主要包括样品的种类、数量和样品保存状况。
② 根据实验设计或文献报道,确认测定哪些指标。测定指标最好是成系列的,这样便于得出明确结论,也好发表文章。
③ 提前了解所在实验室的仪器设备情况,避免因为仪器设备不能满足,造成试剂盒购买后无法使用。
2、选购咨询:
① 客户提供检测样本对象、研究目的和测定指标,我们提供相关试剂盒的情况和所需仪器设备以及自备用品清单,确认哪些指标客户能够通过购买我们的试剂盒进行测定。
② 客户提供样本情况,包括样本种类、样本数量以及样本保存状况,我们计算所需试剂盒的数量和报价,以免错购、漏购、少购或者多购。
3、 收到试剂盒后请注意以下事项:
① 收到试剂盒后,检查外包装有无破损,打开试剂盒找到说明书,按照说明书中对于试剂种类和状态的描述,清点试剂种类和数量是否正常。
② 按照说明书的要求,把试剂放到对应温度的冰箱或者冷藏室保存。
③ 收到试剂盒后,请尽快使用。为了保证测定质量,试剂盒开封后一般应该在一个月内用完。
4、预实验
① 选择2-3个预期差异比较大的样品。
② 按照说明书配制试剂,包括粉剂和自备试剂。
注意:现配现用的试剂,一定要在检测前再配置,避免试剂配制之后放置时间太久!
③ 严格按照说明书进行称量、匀浆、离心、取样、测定。其中,鉴定样品要进行至少两次平行测定,作为技术重复,反映客户实验操作和仪器设备的重复性好坏。
④ 分析预测定结果。待预实验结果确认无误后,再开始正式测定。
5、正式测定
① 预实验结果无误后,开始正式测定!
② 实验时请严格按照说明书上的操作要求进行实验!
③ 实验结束后,分析检测数据。
RNA提取原理:用Trizol 的溶液提取,将总RNA与 DNA 和蛋白质分离。Trizol 是一种酸性溶液,含有硫氰酸胍 (GITC)、苯酚和氯仿。GITC 不可逆地使蛋白质和 RNase 变性。随后进行离心。在酸性条件下,总 RNA 保留在上层水相中,而大部分 DNA 和蛋白质保留在中间相或下层有机相中。然后通过用异丙醇沉淀回收总 RNA。RNase 酶可以通过加入吡咯碳酸二乙酯 (DEPC) 来灭活。
标准物质管理使用规范