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发布日期:2025/1/22 14:06:00

细胞是生物体的结构和功能的基本单位生物学名词。一般具有细胞核、细胞质和细胞膜。植物细胞的细胞膜外还有细胞壁。体形极微,在显微镜下始能窥见。形状多种多样,主要由细胞核与细胞质构成,表面有薄膜。动植物细胞结构大致相同。植物细胞质膜外有细胞壁,细胞壁中常有质体,动物细胞质中常有中心体,而高等植物细胞中则无。细胞有运动、营养和繁殖等机能。

 

下面分享影响细胞活跃度因素:

1温度

哺乳动物及人源细胞培养的适温度为35-37V,对低温耐受力比高温强。39℃以上的培养环境细胞容易受损,甚至死亡。不低于0℃时((0-34),细胞能生存,但代谢降低、分裂延缓。

2气体环境和pH

动物细胞培养需要O2CO2O2通量过大对细胞有毒害,一般使用空气中的O2含量就可以。CO2则与维持培养基的pH有关,细胞培养的-pH7.2-7.4,通过缓冲系统和调节CO2含量,可维持正常pH

开放培养要求5%CO2环境、HEPES(羟乙基哌/嗪乙硫磺酸)10-50mmol/ml可防止培养基的pH变化。含Earle's缓冲系统的培养基适合于5%CO2的培养条件,Hank's缓冲系统的培养基仅含有0.35g/LNaHCO3,不能用于5%CO2的环境,若放入CO2培养箱,溶液将迅速变酸,使用时应注意。

3湿度和光

利用多孔细胞培养板、方瓶、培养皿等开放培养时,相对湿度应控制在95%以上。

动物细胞培养需避光,紫外线或可见光均可造成核黄素、酪氨酸、色氨酸等产生有毒的光产物,抑制细胞生长,降低其贴壁能力。

4影响细胞生长的其他因素

细胞接触橡胶用品,收集细胞时离心速度过大,细胞接种密度过低,细胞悬液或细胞培养物中气泡形成等,均对细胞不利,会导致细胞死亡或生长繁殖抑制。

细胞是许多生物学实验的主角。如果细胞心情不好,那么实验的结果也不会好到哪儿去。如何让细胞快乐?下面就仔细了解一下吧!

1. 确保所有实验室材料都无菌

交叉污染是细胞培养的大敌。即使是最轻微的污染,也可能毁了几个星期的成果。因培养箱内温暖潮湿,真菌极易生长,因此必须注意定期清洁。此外,在将培养瓶、移液管及其他的相关物品放入超净台之前,应用酒精擦拭干净,以避免污染。

2. 在使用前正确解冻细胞

尽管解冻看起来是个简单的步骤,但必须操作得当,以免伤害细胞。长时间暴露在高温条件下会使细胞无法铺板。因此,冻存管应当在37°C水浴中放置2分钟,然后用条件培养基稀释,以避免DMSO造成直接伤害。

3. 小心处理您的培养物

细胞培养的脆弱性怎么强调也不为过。剧烈摇晃,或连续的温度波动可能会对生长产生不利的影响。确保培养箱是水平的,温度均一,且远离电动仪器。此外,尽量避免一次处理多个细胞系,因为它可能会影响细胞的基因型和表型。您还应定期完成STR图谱分析,以确认细胞系的身份。

4. 使用对数生长期的细胞

细胞培养过程共有3个阶段:停滞期、对数期和平台期,分别代表了低细胞生长、高细胞生长和无细胞生长。最有活力的细胞是健康的,快速分裂的,在对数期以70-80%的汇合度存在。

5. 在传代之前不要让细胞汇合

汇合度是指贴壁细胞占据培养瓶表面积的比例。*汇合意味着100%的表面都被贴壁细胞覆盖。一定要避免这种状态,因为它意味着细胞不能继续生长。不过,当务之急是使用活跃生长的细胞。

6. 选择最佳的培养基开发策略

在细胞培养过程中,培养基是控制产品质量、产量和成本的最重要因素。必须针对每种培养物来定制培养基,以优化实验结果。在决定以哪种方式来开发您的培养基时,您有几个选择。您可以购买现成的,自己开发,也可以与另一家公司合作开发特定的培养基。在这个过程中,您需要考虑时间和成本等因素。

 

 

 

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