微生物菌种可以弥补常规饲料中容易缺乏的氨基酸，还能使其它粗饲料原料营养成份迅速转化，达到增强消化吸收利用效果。下面分享微生物菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备\菌种制备 ，其中(1)～(4)为孢子制备过程。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28～37℃培养5～14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐(6)的种子。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶(5)液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

  菌种保藏是指保持微生物菌株的活力和遗传性状的技术。微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡，因而常常造成菌种的衰退。菌种保藏的目的就是使菌株存活、不丢失、不污染杂菌、不发生或少发生变异，保持菌种原有的活性和各种特征。菌种保藏的基本原理是使微生物的生命活动处于半永jiu性的休眠状态，也就是将微生物的新陈代谢作用限制在最低范围内。

实验室常用的保菌方法有：甘油保菌法、斜面保菌法、穿刺保菌法、液体石蜡覆盖保藏法、沙土保藏法、冷冻干燥法。微基生物在以上几种菌种保藏方法的基础上，开发出了保菌效果更好瓷珠保菌法。

一、甘油保菌法

此方法适用于菌种的中长期保藏，保藏时间可在1年以上。由于甘油本身十分粘稠，很难定量，因此一般将甘油和生理盐水按1:1的比例配成终浓度为50%的甘油溶液。使用时，按50%甘油：菌液=1:1的比例混合，使甘油终浓度在20-30%即可，甘油浓度过高或过低都不利于菌种保藏。将甘油菌种转移至-80℃冰箱长期冻存。需要取用菌种的时候，将冻存管放在37℃水浴中快速解冻，直到菌种完全融化，此时可取出菌种进行实验。

此方法适用范围广，操作简单，保藏期长，菌种不容易发生变异。

二、斜面保菌法

将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后转移至4℃冰箱中保藏。保藏的时间根据微生物的种类而不同，一般霉菌、放线菌及产芽孢的细菌保存2-4个月就需要移种一次，酵母菌为两个月，而细菌最好一个月移种一次。需要取用菌种的时候，可用接种环在斜面上挑取少量菌体进行接种。

此方法的优点是操作简单，使用方便，不需特殊设备，能随时检查所保藏的菌株是否死亡、变异或污染杂菌等。缺点是保藏期短，菌种容易变异，因为培养基的物理和化学性质不是严格恒定的，屡次传代会使微生物的代谢发生改变，且此方法污染杂菌的机会较高。

三、穿刺保菌法

准备一管半固体培养基，用接种针挑取菌种，自半固体培养基的中心垂直刺入，直至接近试管底部，但不要穿透，然后沿原穿刺线将接种针退出，于4℃冰箱保存。此方法同斜面保菌法一样需要定期移种。

四、液体石蜡覆盖保藏法

此方法是斜面保菌的辅助方法。将菌种接种在适宜的固体斜面培养基上，待菌充分生长后注入无菌液体石蜡，使其覆盖整个斜面，再直立放置在4℃冰箱中保藏。液体石蜡可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡，同时可以让菌体与空气隔绝，减弱菌种的代谢作用，延长保藏时间。需要取用菌种时，用接种环从斜面上挑取少量菌种即可。

此方法的优点是操作简单，不需要特殊的设备，且不需要频繁移种，保藏时间较长。缺点是保存时必须直立放置，占用空间较大。

五、沙土保藏法

将培养好的菌种与无菌沙土混合，使菌体吸附在沙土载体上，干燥后转移至4℃冰箱保存。需要取用菌种的时候，取出少量沙土颗粒即可。

此方法操作简单，菌种的保藏时间长。

六、冷冻干燥法

将菌种冷冻，在减压下利用升华作用去除水分，使细胞的生理活动趋于停止，从而使菌种长期维持存活的状态。需要取用菌种的时候，用无菌水或培养基重悬菌体，将菌悬液转移至固体培养基平板上进行培养。

此方法适用于菌体的长期保存，但是相关的设备和操作相对其他几种保藏方法都比较复杂。

七、瓷珠保菌法

微基生物在以上几种保藏方法的基础上开发出了瓷珠保菌法，相对传统的保藏方法保菌的效果更好，而且取用方便，可降低菌种因反复冻融而受到的伤害。

瓷珠冻存管中包含12颗磨砂瓷珠和菌种保存液。挑取对数生长期的菌种转移至冻存管中，上下颠倒混匀，此时菌种会均匀分布在保存液中。用移液器吸出保存液，此时在表面张力的作用下，每颗瓷珠表面都会覆盖一层保存液，而菌种就保存在这层保存液中。将含有菌种的冻存管转移至-80℃冰箱即可长期冻存（一般可保存约1年）。

需要取用菌种时，从-80℃冰箱中取出冻存管，轻轻摇晃使瓷珠分散开，挑取一颗瓷珠接种至培养基平板上进行划线培养，或接种至液体培养基中进行摇菌培养。接种完成后，迅速将冻存管放回冰箱中。

针对厌氧菌株，我们也能够提供含有还原剂的厌氧性保存液，并对菌种采用真空包装，避免菌种因接触氧气而死亡。

微生物菌种可以弥补常规饲料中容易缺乏的氨基酸，还能使其它粗饲料原料营养成份迅速转化，达到增强消化吸收利用效果。下面分享微生物菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备\菌种制备 ，其中(1)～(4)为孢子制备过程。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
放线菌孢子的培养基大多是采用麸皮或豌豆浸出液及无机盐与琼脂制成的。将斜面孢子接入扩大的扁瓶孢子培养基中,于28～37℃培养5～14天。所获得的大量孢子可直接作为种子罐(6)的种子。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶(5)液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐(7)的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。